Определување на содржината на оксална киселина во овошјето и зеленчукот со високо-перформансна течна хроматографија (HPLC)
1. Експериментален принцип и дизајн на метод
Како вообичаена органска киселина во овошјето и зеленчукот, содржината на оксална киселина директно влијае на вкусот и хранливата вредност на храната. Овој експеримент користи обратнофазна високо-перформансна течна хроматографија (RP-HPLC). Под кисели услови на мобилна фаза, оксалната киселина се одделува од интерферентните супстанции со помош на C18 хроматографска колона. За квантитативна анализа се користи ултравиолетов детектор поставен на 210 nm, врз основа на карактеристиките на UV апсорпција на карбоксилните групи во молекулите на оксална киселина.
2. Стандардна крива и подготовка на примерок
За подготовка на стандардни раствори се користи метод на градиентно разредување: прецизно измерете 25,0 mg оксална киселина дихидрат и разредете до 25 mL со ултрачиста вода за да се добие основен раствор од 1 mg/mL. Овој секвенцијално се разредува во серија стандардни раствори на 50, 100, 200, 400 и 800 µg/mL, при што секоја концентрација се инјектира трипати.
За подготовка на примерокот се користи екстракција со помош на микробранова печка: измерете 5,00 g хомогенат од овошје/зеленчук, додадете 10 mL раствор од хлороводородна киселина од 0,1 mol/L, третирајте на 60°C со микробранова печка 10 минути, филтрирајте низ мембрански филтер од 0,45 µm и соберете го филтратот за тестирање.
3. Оптимизација на хроматографските услови
Мобилната фаза е систем од калиум дихидроген фосфатен пуфер од 0,01 mol/L (pH 2,5)–ацетонитрил (95:5), со брзина на проток од 0,8 mL/min и температура на колоната од 35°C. Прилагодувањето на пропорцијата на ацетонитрил покажува дека кога органската фаза надминува 10%, времето на задржување на оксалната киселина се скратува на помалку од 3 минути, но се јавува намалување на врвовите. Под конечните оптимизирани услови, времето на задржување на оксалната киселина е 4,2 минути, со што се постигнува целосно одвојување од соседната лимонска киселина и јаболкова киселина (резолуција > 1,5).
4. Валидација на методот
Верификацијата на линеарен опсег покажува добра линеарна врска помеѓу површината на пикот и концентрацијата во опсег од 10–1000 µg/mL (R² = 0,9993). Границата на детекција (LOD), одредена со методот на однос сигнал-шум, е 0,5 µg/mL. Во тестовите за повторување, RSD за шест повторени определувања на истиот примерок од спанаќ е 1,8%. Експериментите со обновување на шилци на три нивоа (80%, 100% и 120%) даваат просечни обновување од 98,2%, 102,4% и 97,8%, соодветно, што ги исполнува барањата за квантитативна анализа.
5. Анализа на реални примероци
Тестирани се шест комерцијално достапни овошја и зеленчуци: спанаќ (356 ± 12 mg/100 g), целер (215 ± 9 mg/100 g), домат (18 ± 2 mg/100 g), јаболко (6 ± 1 mg/100 g), банана (не е детектирана) и брокула (89 ± 5 mg/100 g). Споредбата со националниот стандарден метод (GB 5009.277-2016) покажува дека релативното отстапување помеѓу двата метода е помало од 5%, што ја потврдува веродостојноста на овој метод. Особено, HPLC методот покажува поголема чувствителност од традиционалните методи на титрација при анализа на примероци со ниска содржина.
6. Клучни забелешки
Строго контролирајте ја pH вредноста за време на претходната обработка на примерокот. Ако pH вредноста на екстрактот надмине 3, таложењето на калциум оксалат ќе доведе до ниски резултати од тестот. Мобилната фаза треба да се подготвува свежа секојдневно за да се избегне таложење на сол и блокирање на колоната. По секои 20 инјекции, исплакнете ја колоната со ацетонитрил-вода (30:70) 30 минути за да се спречи влошување на ефикасноста на колоната. За примероци што содржат пигмент (на пр., виолетова зелка), се препорачува да се додаде чекор на прочистување на екстракцијата во цврста фаза пред инјектирање.
7. Насоки за примена и проширување
Овој метод може да се прошири на откривање на оксална киселина во биолошки примероци како што се урина и крв. Со прилагодување на составот на мобилната фаза (на пр., додавање на тетрабутиламониум хидроксид), оксалната киселина и нејзините метаболити можат да се одредат истовремено. Во комбинација со детектор за масена спектрометрија, може да се воспостави попрецизен метод за откривање на траги. Во прехранбената индустрија, овој метод може да обезбеди важна поддршка на податоци за избор на сорти со ниска содржина на оксална киселина и оптимизација на процесите на готвење.
Зибо Анхао Кемикал Ко., ДОО – Оксална киселина
„Зибо Анхао Кемикал Ко., Лтд.“ е сигурен снабдувач и извозник на висококвалитетна оксална киселина (индустриски квалитет, 99,6% минимум) од Шандонг, Кина. Нашата оксална киселина е бела кристална цврста материја, позната и како етандиоева киселина, со молекуларна формула C₂H₂O₄. Се одликува со висока чистота, ниски нечистотии и стабилен квалитет во сите серии, задоволувајќи ги барањата на текстилната, кожарската, металуршката, преработката на ретки земни елементи, хемиското чистење и градежната индустрија.
Испорачуваме и безводна и дихидратна оксална киселина, достапна во вреќи од 25 кг, вреќи од 50 кг и вреќи за големо пакување од 1000 кг. Со строги процедури за контрола на квалитетот, комплетни извештаи од тестови и флексибилни планови за снабдување, ние обезбедуваме стабилна испорака и конзистентни перформанси за глобалните купувачи. Нашите производи се широко извезени во Југоисточна Азија, Европа, Африка и Америка, добивајќи признание за сигурен квалитет и конкурентни цени.
Изберете го Zibo Anhao Chemical за сигурно снабдување со оксална киселина и професионална хемиска услуга на едно место.
Изберете ја Zibo Anhao Chemical за оксална киселина со висока чистота која обезбедува стабилни перформанси и вредност за вашиот бизнис. Контактирајте не за нарачки на големо или технички спецификации: info@anhaochemical.com
